Injertos óseos - Nueva alternativa. Fase I. Extracción de proteínas morfogenéticas parcialmente purificadas de hueso bovino

Jairo Rivera Posada, Carlos H. Riaño, Paula A. Monsalve, Adriana Osorio

Abstract


Resumen

El propósito de esta investigación fue extraer a partir de hueso bovino y mediante procedimientos químicos, Proteínas Morfogenéticas Óseas (PMO), parcialmente purificadas que posean características osteoinductivas, de alta calidad, baja antigenicidad y alta biodisponibilidad, para ser utilizadas como material de injerto óseo. El procedimiento  se llevó a cabo mediante cinco  etapas básicas así: Molienda del material; extracción de lípidos; desmineralización; extracción del colágeno; obtención de la fracción proteica. Para verificar la efectividad de la desmineralización y demás procesos,  se procedió como sigue: Método de Soxhlet; espectrometría de Absorción Atómica de Calcio; tinción de picrofucsina de Van Gieson; electroforesis en Gel de Poliacrilamida-Dodecil Sulfato Sódico. Se obtuvo  un material con proteínas de peso molecular aparente en el rango de 18 a 120 KDa, principalmente en las bandas correspondientes a 18, 24, 34, 68, 72, 90, 120 KDa, mediante electroforesis en Gel de Poliacrilamida Dodecil Sulfato Sódico (SDS-PAGE) el cual fue liofilizado y almacenado en ampollas de vidrio selladas al vacío para su conservación y uso posterior.

Palabras clave: biomateriales, factores de crecimiento, osteoregeneración.

Summary

The purpose of this research was to extract from bovine bone and through physical and chemical procedures, Bone Morphogenetic Proteins (BMPs) partially purified, with high-quality osteoinduction characteristics, low antigenicity and high bioavailability. These proteins will be utilized as bone graft material. The procedure was performed through five basic steps: Milling the bovine bone, lipid extraction, demineralization, collagen extraction, obtention of the protein fraction. These steps were verified respectively through the following analysis: The Soxhlet method, Atomic Absorption for Calcium determination, Van Gieson Pycrofucsin Stain., Polyacrilamide Gel-Electrophoresis-SodiumDuodecyl-Sulphate (PAGE-SDS).  BMPs partially purified were obtained through Polyacrilamide Gel-Electrophoresis-Sodium-Duodecyl-Sulphate (PAGE-SDS., with molecular weights between 18 - 120 Kda, mainly bands at 18, 24, 34, 68, 72, 90 and 120 KDa, This material was lyophilized, packed and stored in a vacuum sealed narrow-neck bottle for posterior use.

Key words: biomaterials, growth factors, osteoregeneration.

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Abstract : 203 PDF : 662

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