Comparison of three sampling procedures for evaluation of intestinal villi: swine model

Mateo Itza-Ortiz, Andrés Quezada-Casasola, Yamicela Castillo-Castillo, Elizabeth Rodríguez-Galindo, José María Carrera-Chávez, Ubicelio Martín-Orozco, Esaúl Jaramillo-López, Ana Calzada-Nieves

Abstract


Background: Villi morphology and function affect the absorption capacity of the small intestine. Most tissues are fragile and their morphology may change with excessive manipulation and inadequate sampling techniques. Intestinal sampling includes methodologies such as cutting longitudinally or transversely, keeping the intestinal content in it and preserving all in a 10% formalin solution; washing the intestinal sample in saline solution while emptying it by pressing downwards with two fingers, conserving the sample in a 10% formalin solution and knotting both ends of the sample, introducing 10% formalin into it and preserving it in the same solution. Objective: To compare height, area and desquamation caused by washing, pressing, and knotting used in sampling and conservation techniques of small intestine villi of pigs. Methods: Samples (n = 270) from duodenum, jejunum and ileum of 30 Landrace × Yorkshire crossed pigs, aged 7 to 8 months were randomly subjected to washing, soft pressing or knotting procedures, fixed in 10% formalin solution, embedded in paraffin, and stained with eosin and hematoxylin. Intestinal villi in each slide were observed to determine height, surface area and cellular desquamation of each villus. Results: Villi height from duodenum and ileum knotted samples was higher (p < 0.05) compared with samples from the other procedures in the same anatomical portion, which were similar to each other (p > 0.05). Villi from knotted jejunum samples were the shortest (p < 0.05) compared to the other two procedures, which were similar to each other (p > 0.05). Knotted samples from ileum had larger villi area compared with the rest of the procedures and intestinal portions (p < 0.05). Villi desquamation was similar among procedures and portions of the intestine (p > 0.05). Conclusion: Knotting is the recommended procedure for intestinal cell morphometry evaluation, as values of villi height and area are higher. Desquamation in the three procedures may be related to epithelial restoration processes.

Keywords: histopathology, knotting, sampling, tissue conservation.

 

Resumen

Antecedentes: La morfología y función de las vellosidades afectan la capacidad de absorción del intestine delgado. La mayoría de los tejidos son frágiles y su morfología puede cambiar con una manipulación excesiva y técnicas de muestreo inadecuadas. El muestreo intestinal incluye metodologías tales como el corte longitudinal o transversal, conservando el contenido intestinal y conservando todo en una solución de formol al 10%; lavado de la muestra de intestino en solución salina mientras se vacía, presionándola hacia abajo con dos dedos, conservando la muestra en solución de formol al 10% y anudando ambos extremos de la muestra, introduciendo en ella formol al 10% y preservándola en la misma solución. Objetivo: Comparar la altura, área y descamación causada por el lavado, presión y anudamiento utilizados en la toma de muestras y técnicas de conservación utilizadas en vellosidades intestinales en cerdos. Métodos: Se obtuvieron 270 muestras de duodeno, yeyuno e íleon de 30 cerdos cruzados Landrace × Yorkshire de 7 a 8 meses de edad, y se sometieron aleatoriamente a procedimientos de lavado, prensado suave o anudado y fueron fijados en solución de formol al 10%, procesados por inclusión en parafina y teñidos con eosina y hematoxilina. Se observaron las vellosidades intestinales de cada muestra para determinar su altura, la superficie de cada vellosidad y la descamación celular. Resultados: La altura de las vellosidades de las muestras anudadas de duodeno e íleon fue mayor (p < 0,05) que las muestras de los otros procedimientos en la misma porción anatómica, las cuales fueron similares entre sí (p > 0,05). Las vellosidades procedentes de muestras de nudos de yeyuno fueron las más cortas (p < 0,05) en comparación con los otros dos procedimientos, que fueron similares entre sí (p > 0,05). Las muestras anudadas del íleon presentaron mayor área de vellosidades que el resto de los procedimientos y porciones intestinales (p < 0,05). La descamación de las vellosidades fue similar en todos los procedimientos y porciones del intestino (p > 0,05). Conclusión: El procedimiento de anudamiento es el recomendado para la evaluación morfométrica de células intestinales, considerando que los valores de altura y área de las vellosidades son mayores. La observación de la descamación en los tres procedimientos puede estar relacionada con un proceso de restauración epitelial.

Palabras clave: anudamiento, conservación tisular, histopatología, muestreo.

 

Resumo

Antecedentes: A morfologia e função das vilosidades afeta a capacidade de absorção no intestino delgado. A maioria dos tecidos são frágeis e podem mudar sua morfologia com um manuseio excessivo e técnicas de amostragem inadequada. A amostragem de intestino inclui metodologias tais como corte longitudinal ou transversal, conservando o conteúdo intestinal e mantendo tudo em uma solução de formalina a 10%. A amostra do intestino é lavada em solução salina enquanto se esvazia pressionando para baixo com dois dedos, após isso a amostra é submergida em uma solução de formalina a 10% e atam-se as duas extremidades do intestino, mais formalina 10% é introduzida no mesmo e é preservado na mesma solução. Objetivo: Comparar a altura, área e descamação nas vilosidades do intestino delgado em porcos, causada pela lavagem, pressão e colocação do nó y pelas técnicas de conservação. Métodos: Duzentos e setentaa mostras de duodeno, jejuno e íleo de 30 porcos de cruzamento de raças Landrace e Yorkshire de sete a oito meses de idade foram submetidos aleatoriamente a procedimentos de lavagem, prensagem suave ou colocação de nós e foram fixados em solução de formalina a 10%, processados para inclusão em parafina e corados com hematoxilina e eosina. Foram observadas as vilosidades de cada amostra para determinar a sua altura, a superfície de cada célula vilosidade e descamação celular. Resultados: A altura das vilosidades nas amostras de duodeno e íleo com nó foi maior (p < 0,05) do que as amostras de outros procedimentos na mesma parte anatómica, as quais foram semelhantes entre si (p > 0,05). Amostras de jejunos com nó apresentaram vilosidades menores (p < 0,05) em comparação com os outros dois procedimentos, que foram semelhantes entre si (p > 0,05). Amostras de íleo com nó apresentaram maior área nas vilosidades do que outros procedimentos e outras porções do intestino (p < 0,05). A descamação das vilosidades foi semelhante em todos os procedimentos e porções do intestino (p > 0,05). Conclusão: O procedimento de colocação do nó é o recomendado para a avaliação morfométrica das células intestinais, já que os valores de altura e área das vilosidades são mais elevados. A observação da descamação nos três procedimentos poderia estar relacionada com um processo de restauração epitelial.

Palavras chave: amostragem, colocação de nó, histopatologia, preservação de tecido.


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Abstract : 1119 PDF : 1672

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